ДНХ-ийн синтезийн үндсэн зарчим

Химийн ДНХ-ийн синтез нь хатуу фазын синтезийн стратеги ба фосфорамидитын химийн найрлагад суурилдаг.Биологийн ДНХ-ийн синтезээс ялгаатай нь химийн ДНХ-ийн нийлэгжилтийн материал нь Зураг 1-д үзүүлсэн шиг DMT (4, 4-диметокситритил) ба фосфорамидитын өөрчилсөн дезоксирибоксид юм. ДНХ-ийн нийлэгжилтийг хатуу тулгуур дээр гүйцэтгэдэг(бид янз бүрийнОлиго синтезийн багана), өөрөөр хэлбэл CPG (хяналттай нүх сүвний шил) ба PS (полистирол) ба синтезийг бүхэлд ньДНХ/РНХ синтезаторМанай үндсэн төхөөрөмж болох HY Single Channel Synthesizer, HY-12, HY-192 гэх мэт өөр өөр загвартай, синтезийн чиглэл нь 3'-ээс 5' хүртэл, нуклеотид нь хатуу тулгуурт нэг төхөөрөмжөөр нэвтэрдэг. синтезийн мөчлөг.Ердийн синтезийн мөчлөг нь хамгаалалтыг арилгах, холбох, таглах, исэлдүүлэх гэсэн дөрвөн үе шатыг агуулдаг (Зураг 2).Хамгаалалтгүй болгох нь хатуу тулгуур дээрх DMT бүлэг эсвэл өмнөх нуклеозид дээрх 5' гидроксил бүлгийг арилгахаар тохируулагдсан ба дихлорометан дахь 3% -ийн трихлорацетик хүчлийг хамгаалалтын урвалж болгон ашигладаг.Дараа нь фосфорамидитын өөрчилсөн дезоксирибоксизидыг идэвхжүүлэгч, өөрөөр хэлбэл 5-этилтиотетразол эсвэл 4,5-дицианомидазолын тусламжтайгаар фосфитетриэфир (III) үүсгэн гидроксил бүлэгт үзүүлэхийг зөвшөөрч, Холбох үе шатыг хэрэгжүүлэв.Холбох үе шатанд урвалд ороогүй гидроксил бүлгийг хааж, хүсээгүй согогийн дараалал үүсэхийг багасгахын тулд битүүмжлэх алхамыг хийдэг.Эцэст нь тогтворгүй фосфитетриэстер (III) нь пиридиний одоогийн исэлдүүлэгчээр иодыг химийн тогтвортой фосфортристер (V) болж исэлдүүлдэг.

Синтезжүүлсэн ДНХ нь аминолизоор хатуу тулгуураас салж, фосфортристер дээрх 2-цианэтил хамгаалагдсан бүлэг ба нуклеобаза дээрх амид зэрэг хуваагдаж, синтезийн хавтан ба нийлэг баганыг шууд урвалын камерт байрлуулна. -ийнХамгаалалтгүй болгох төхөөрөмж.Түүхий ДНХ-ийг HPLC, электрофорез болон OPC-ээр хүссэнээр бэлтгэж болох бөгөөд бид танд мөн өгөх боломжтой.Цэвэршүүлэх төхөөрөмждараах боловсруулалтад зориулагдсан.